提高移液准确度和精密度的技巧与提示
提高移液准确度和精密度的技巧与提示
移液器是生命科学实验室的常用工具，但即使每次都遵循相同的流程，有些研究人员的液体处理技术仍然会存在不一致。这可能导致实验数据不理想以及可重复性问题，进而对结果的完整性产生不利影响。液体处理中的质量保障工作通常都着重于移液器的校准、维修和维护，但对于高效的工作流程和成功的项目而言，确保正确且一致的移液技术也同样重要。
在INTEGRA，我们的应用团队在液体处理方面拥有数十年的综合经验，因此我们整理归纳出了这一系列视频来为您和您的实验室同事提供正确移液的通用准则以及技巧与提示。遵循这些简单的指导将有助于确保：
- 每一次吸取和分液的准确度和精密度，进而提高结果的可重复性和可靠性
- 一致的操作，不论手动还是电动微量移液器
- 优化‘疑难液体’的移取 – 比如粘性和挥发性液体
- 正确的维护，保证长期的正常运转
准确度和精密度是什么？为什么它们对移液来说很重要？
移液准确度是指实际吸取的体积与设定值之间的接近程度，而精密度则是指多次分液中体积的一致程度。维护良好的移液器可以让您确信您使用的是精确的工具，但每一次分液的准确度则取决于能否正确使用该工具以及操作者的经验。该视频阐述了移液操作中准确度和精密度的重要性，来帮助您确定在自己的工作流程中可能遇到的困难，以及如何通过简单的调整来改善结果。
我什么时候应该使用手动或电动移液器？
手动还是电动？对于几个独立样品的分液来说，手动移液器是非常棒的工具，但电动移液器所提供的更高的通量和重复分液功能则有助于减轻您的工作量。电动移液器还能提供更高的精密度（因为柱塞运动由电机控制）和更符合人体工程学的解决方案，体力消耗更低，所需的吸取/分液循环次数也更少。该视频将帮助您做出更明智的决定，以了解工作流程的每一项工作选择到底应该使用手动移液器还是电动移液器。
我可以在整个量程范围内使用移液器吗？
对于任何移液器，我们都建议在其量程的35-100%范围内使用。这是因为在低于指定最大容量的35%时，准确度和精密度都会降低。然而这也只是冰山一角！想了解更多关于移液量程的实用知识和技巧提示，请观看本视频。
为什么我的枪头会滴液？
由于枪头、液体以及实验室环境之间的大气差异，在吸取之后，移液枪头内的液体几乎立刻就会开始挥发。这可能造成枪头内的气压升高，从而导致液体被挤出并滴落。在处理挥发性液体（如乙醇、丙酮或氯仿）时，这种问题更为常见，且其影响面可能很广，既会造成移液精密度和准确度的降低，也可能导致工作区的污染。该视频介绍了针对这类问题的简单解决方案，例如如何正确地预润湿您的移液器来平衡枪头内的气压和湿度。
我该如何握持移液器才能更准确、更精密地移液？
对于大多数研究人员来说，移液器操作已经成为了一种堪比本能的技能，但不良的习惯可能会降低整体的精密度和准确度。这可能会对后续的结果产生连锁反应式的显著的影响。幸运的是，提高您的移液技术并不难，且立竿见影。例如，您知道尽可能以相同的角度握持移液器的重要性吗？或者，处理体积小于50 μl的微量液体时应该完全竖直地握持移液器？所有的这些，以及真实的演示，都能在该视频中找到。
在吸取时，我的移液器插入液体的深度重要吗？
简单来说，是的，这很重要。移液器枪头的浸入深度非常重要，因为在源液体中浸入得越深，多余液体粘附在枪头外壁的可能性就越大。这可能导致吸取的液体略微多于预期，对您的工作流程和结果产生不利的影响，特别是在移取非常小的体积时。理想情况下，枪头应当仅插入源液体液面下2-3 mm进行吸取，您可以利用源容器侧壁作为辅助引导。不过也有例外，请观看视频了解更多。
分液后，枪头上还留有一滴液体，我应该如何处理？
分液后，枪头末端可能会留有一滴液体。这也是目标体积的一部分，必须加入到已分配的液体中。这就需要“枪头接触”或 “接触分离”，有三种方式可以实现。观看视频，了解在您的应用中应该使用哪一种。
我该如何移取非常粘稠的液体？
对于生命科学实验室中的移液来说，这可能是最大的痛点之一。首先，您需要以更慢的速度移液，并且在每次完成吸取或分液之前停顿。使用反向移液技术也是明智的选择，即吸取多于所需体积的液体，分配出想要的量，并丢弃分配后的少许过量液体。
我该如何移取挥发性液体
移取挥发性液体也意味着您必须稍微改变您的技巧以避免出现不足量分配。这是因为挥发性液体挥发得更快，可能造成枪头滴液并在吸取和分液过程中损失液体。解决该问题的理想方法是使用待移取的液体来预润湿您的枪头。如此可以平衡枪头内的气压和湿度。吸取之后比平常更快地移取液体也是明智的选择，即将您的液体尽可能快地移入目标容器。最后，反向移液也会有帮助。但是，这些规则也有例外情况，请观看视频了解更多！
为了提高使用电动移液器进行重复分液的准确度和精密度，我能做些什么？
在重复分液时，您应该始终丢弃首次和末次分液。这是因为移液器的内部装置需要从吸取方向转为分液方向，有可能影响首次分液的准确度。类似的，末次分配中累积了来自其他分配等份的所有准确度误差，可能与目标体积不一致。该视频涵盖了所有这些内容，并附带演示。
怎样才能确保我的移液器能够长久地发挥尽可能好的性能？
定期维护是确保您的移液器在使用寿命内保持更高准确度和精密度的最后一个关键因素。不使用时的正确存放，以及定期清洁、渗漏检测和校准，这些都非常重要。观看该视频，我们的使用指南涵盖了所有这些内容。
